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流式细胞术的基础和临床应用
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流式细胞术的基础和临床应用
吴长有
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前 言
第一章 总 论
第一节 流式细胞术与流式细胞仪概述
一、流式细胞术概述
二、流式细胞仪
第二节 荧光染料的选择与常用的染色技术
一、荧光染料的特性及其应用
二、常用的染色技术
第三节 结果分析与流式图
一、流式通道
二、流式直方图
三、流式散点图
四、流式等高线图
第四节 流式细胞术的基本操作与技巧
一、标本的采集、运送与储存
二、标本的处理
三、荧光素偶联抗体及其标记方法
四、光电倍增管电压设定
五、对照的设置
六、补偿调节
七、阈值设定
八、流式分选模式选择
九、上样速度控制
十、分选设门基本原则
十一、流式分选基本步骤
第五节 方法学特点
一、单细胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、准确性
五、特异性
六、可重复性
七、多参数分析
第六节 常见影响因素
一、温度
二、pH
三、荧光染料浓度
四、杂质
五、细胞固定剂
六、溶液黏度
七、其他因素
第七节 质量控制
一、室内质量控制
二、室间质量评价
第八节 新 进 展
一、不设门流式方法的应用
二、介绍几个较有用的组合
参考文献
第二章 流式分析术及流式分选术的应用
第一节 流式分析术的应用
一、细胞群比例测定
二、机体免疫功能监测及细胞表型鉴定
三、检测细胞因子
四、检测细胞增殖
五、检测细胞凋亡
六、检测细胞周期
七、检测细胞杀伤能力
八、检测细胞吞噬功能
九、检测胞内活化的激酶
十、检测基因表达
十一、检测钙相关分子
十二、表观遗传学中的应用
十三、检测缝隙连接介导的细胞通讯
十四、检测细胞内pH和钠氢转运体活性
十五、细胞间及细胞与环境间相互作用
十六、其他应用
第二节 流式分选术的应用
一、流式分选与磁性分选
二、流式分选独立群体细胞
三、流式分选非独立细胞群体
四、流式分选低比例细胞群体
五、流式分选干细胞
参考文献
第三章 流式细胞术的临床应用
第一节 感染性疾病
一、微生物检验
二、AIDS患者的免疫功能检测
第二节 血液系统疾病
一、机体造血功能监测
二、机体凝血功能监测
三、白血病免疫诊断与分型
第三节 自身免疫性疾病的鉴别诊断
一、自身抗体的检测
二、强直性脊柱炎的鉴别诊断
三、阵发性睡眠性血红蛋白尿与PNH克隆检测
第四节 肿瘤临床中的应用
一、细胞周期与DNA倍体检测
二、细胞凋亡检测
三、肿瘤化疗多药耐药性监测
第五节 移植中的应用
一、干细胞移植
二、骨髓移植
三、器官移植
第六节 超敏反应中的应用
一、IgE的检测
二、促炎因子的检测
参考文献
附 录
附录一 临床常见流式检验指标的正常参考范围
附录二 临床流式细胞学检验技术相关名词
1.流式细胞术(flow cytometry,FCM)
2.流式细胞仪
3.鞘液
4.荧光光谱(fluorescence spectrum)
5.荧光寿命(fluorescence lifetime)
6.荧光强度(fluorescence intensity)
7.光化分解(photodissociation)
8.浓度淬灭
9.荧光补偿(fluorescence compensation)
10.同型对照(isotypism control)
附录三 常用流式检验试剂的配制
附录四 流式细胞仪工作术语
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